进口分装:检测范围和灵敏度不同,用量少时,可使用分装,前期是它的长久性不是很好。试剂盒的标准曲线较高点OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。试剂盒重复性好,cAMP assaykit,板内、板间变异系数均<9 %。试剂的组份都多给20%的富余量,确保完成48/96孔的检测,避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。检测抗l体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作,保证实验结果的重复性。
灵敏度
通过比较10个B0孔平均光密度值(OD)和10个5号管标准品的平均光密度值,计算出灵敏度。cAMP浓度的检测极限通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。
OD(B0平均数) =0.685± 0.003
OD(5号 标准品平均数)=0.604± 0.010
光密度偏差(0-0.4 pmol/mL) =0.081
2 SD"s of the Zero Standard =0.006
灵敏度 =08×0.4 pmol/mL =29.6 fmol/mL
对于生长的组织培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1M HCl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%浓度的Triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有Triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 mL细胞培养上清加入10μL浓盐酸,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。
纽斯特-cAMP assaykit由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是湖北 武汉 ,生物化工的企业,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在纽斯特领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创纽斯特更加美好的未来。